分離各種細胞器的方法有哪些
2022-11-10 10:38:03文/張哲細胞器的分離,一般采用差速離心法,此法是利用細胞各組分質量大小不同,在離心管不同區(qū)域沉降的原理,分離出所需組分,分離得到的細胞器,其純度可采用電子顯微鏡法、免疫學法或測定標志酶活力法進行鑒定。(文章內容來源于網(wǎng)絡,僅供參考)

分離各種細胞器的方法
1、分離各種細胞器常用的方法是差速離心法。在密度均一的介質中由低速到高速逐級離心,用于分離不同大小的細胞和細胞器。在差速離心中細胞器沉降的順序依次為:核、線粒體、溶酶體與過氧化物酶體、內質網(wǎng)與高基體、最后為核蛋白體。
由于各種細胞器在大小和密度上相互重疊,而且某些慢沉降顆粒常常被快沉降顆粒裹到沉淀塊中,一般重復2~3次效果會好一些。
差速離心只用于分離大小懸殊的細胞,更多用于分離細胞器。通過差速離心可將細胞器初步分離,常需進一步通過密度梯離心再行分離純化。
2、密度梯度離心,用一定的介質在離心管內形成一連續(xù)或不連續(xù)的密度梯度,將細胞混懸液或勻漿置于介質的頂部,通過重力或離心力場的作用使細胞分層、分離。這類分離又可分為速度沉降和等密度沉降平衡兩種。密度梯度離心常用的介質為氯化銫,蔗糖和多聚蔗糖。
細胞中的細胞器有哪些
線粒體,是細胞進行有氧呼吸的主要場所,具有雙層膜,線粒體又被稱為‘動力車間’因為細胞生命活動所需要的能力95%都是來自線粒體。
葉綠體,是綠色植物葉肉細胞中進行光合作用的細胞器。
內質網(wǎng),是由膜連接而成的網(wǎng)狀結構,單層膜,是細胞內蛋白質加工,以及脂質合成的“車間”。可分為滑面內質網(wǎng)和粗面內質網(wǎng),粗面內質網(wǎng)加工蛋白,滑面內質網(wǎng)合成脂質。真核動植物細胞中都含有內質網(wǎng)。
核糖體,無膜結構,分為附著核糖體和游離核糖體,將氨基酸合成蛋白質是由rRNA和核糖核蛋白構成的微小顆粒,是合成蛋白質的場所,所有細胞都含有核糖體。
高爾基體,與細胞分泌物的形成有關,主要是對蛋白質進行加工和轉運,植物細胞分裂時,高爾基體與細胞壁的形成有關。
中心體是細胞中一種重要的無膜結構的細胞器,存在于動物及低等植物細胞中。每個中心體主要含有兩個中心粒。它是細胞分裂時內部活動的中心。
溶酶體,溶酶體是由高爾基體斷裂產(chǎn)生,單層膜包裹的小泡,數(shù)目可多可少,大小也不等,含有60多種能夠水解多糖,磷脂,核酸和蛋白質的酸性酶,這些酶有的是水溶性的,有的則結合在膜上。
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